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国科控股中科检测消毒产品实验室结合自身行业优势,带大家了解抑菌环试验的详细过程:
一、抑菌环试验常用试验菌:
1、细菌代表:肠杆菌、金黄色葡萄球菌
2、真菌代表:霉菌(黑曲霉)和酵母菌(白色念珠菌)
3、分枝杆菌代表:龟分枝杆菌
4、细菌芽孢代表:枯草杆菌黑色变种芽孢
二、抑菌环试验依据:《消毒技术规范》-2.1.8.2
三、抑菌环实验原理:
利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度,以显示其抑菌作用。
试验通过抑菌环大小以判断其是否具有抑菌能力。
适用于抑菌剂和溶出性抗(抑)菌产品的鉴定。
四、抑菌环试验步骤:
试验菌的接种:用无菌棉拭子蘸取试验菌悬液,在预先倒好的培养基表面均匀涂抹3次,每涂抹一次,平板转动60°,后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周,盖好平皿,置室温干燥5min后备用。
样品制备:每片滴加实际使用浓度抑菌剂溶液 20μL,然后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内,干燥后备用。
样品接种:每次试验贴放1个染菌平板,每个平板贴放4片试验样片和1片阴性对照。用无菌镊子取样片贴放于平板表面,各样片距离25mm以上,与平板的周缘相距15mm。
培养:贴好后,用无菌镊子轻压样片,使其贴于平板表面。盖好平皿,37℃培养16~18h后观察结果。
五、抑菌环结果判定:
抑菌环直径大于7mm者,判为有抑菌作用
抑菌环直径小于或者等于7mm者,判为无抑菌作用
阴性对照组应无抑菌环产生,否则试验无效。
3次重复试验均有抑菌作用结果者,判为合格。
六、抑菌环试验注意事项:
取样前,样品需要摇匀再取样。
接菌用菌菌悬液的浓度应符合要求。浓度过低,接菌量少,抑菌环增大,浓度过高,接种量过多,抑菌环变小。
培养时间不得超过18h,培养过久,部分细菌可恢复生长,抑菌环变小,影响试验的准确性。
抑菌环直径可受抑菌剂的量,抑菌性能和干湿度的影响,固滤纸片应该提前制备灭菌并干燥好备用。
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